CONTROL DE
CALIDAD PARA LA BACTERINA CORIZA
AVIAR
Carlos
Rodríguez G. Laboratorios Biofarma Noviembre de 2012
Las pruebas de control de calidad para la bacterina de
Coriza, son muy similares si es de cultivo en embrión de pollo como en caldo de
cultivo y son de carácter obligatorio para cada lote.
Titulación
1.-Se toma una muestra del cultivo 10 ml son suficientes. Se
siembra en agar sangre, cruzar la siembra con la Nodriza. Incubamos
por 24 horas.
2.- Al mismo tiempo, procedemos a hacer una titulación,
tomamos una serie de tubos 6 en total que contengan Caldo Infusión de Corazón
y Cerebro cada tubo conteniendo 4.5 ml.
3.-Tomamos una muestra del cultivo por titular 0.5 ml y lo
agregamos al primer tubo, con otra pipeta diferente mezclamos todo el contenido
del tubo, por 5 veces.
4.-Ya tenemos la primera dilución 1 en 10 y a si continuamos
con los tubos restantes , hasta que al final desechamos 0.5 ml. consiguiendo la
dilución de10-1 a
10-6.
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| NEFELÓMETRO |
6.-Colocamos con una jeringa de tuberculina 0.01ml por
cuadro empezando por la dilución más alta a la mas baja 10-3 y desechando 0.5
al final.
Dejamos la caja de agar, el tiempo suficiente para que las
gotas se sequen, e inmediatamente después usando una asa de platino, tomamos la
cantidad suficiente de Nodriza para hacer una cuadricula sobre el agar
7.-Incubamos por 24 horas
8.- A las 24 horas contamos las colonias de cada cuadro
empezando por 10-6, esto se puede hacer a simple vista o con un cuenta
colonias, se suman las colonias y se saca un promedio, ese número de colonias
representa el titulo en la dilución 10-6 por 0.01ml, pero como debemos dar el
título por ml. se recorre hasta la dilución 10.8 por ml.
9.- Es recomendable hacer esta prueba por duplicado para
evitar algún error
Existe un método de titulación que nos permite saber al
instante la cantidad de microorganismos por ml. Y es muy usado durante la
vigilancia del crecimiento en nuestro reactor, cuando estamos produciendo el
cultivo en caldo, no es exacto pero si nos da una idea aproximada de la
titulación.
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| TITULACION |
Este método comparativo nos permite saber en que momento
llegamos a la curva de máximo crecimiento y es muy recomendable por su
simplicidad y por su resultado
La siembra directa que se hace en agar sangre debe ser un
cultivo puro, se compara con una siembra en agar infusión de corazón y cerebro AICC
que debe salir negativa.
Cuando la bacterina esta inactivada hacemos una prueba de
inocuidad, sembrando en AICC y en agar verde brillante,
Resultado: Después de un periodo de incubación por 48 horas,
los cultivos deben ser negativos.
11.- Se inocula 0.1 ml a 5 embriones de entre 10 a11 días de
incubación durante 3 días, en seguida
hacemos una prueba de hemoaglutinación y observamos si algún embrión no esta
retrasado de tamaño o en forma de U muy cerrada, con esto descartamos si hay
alguna contaminación por virus de Newcastle, Influenza o Bronquitis
12,.Hacemos una prueba de potencia, vacunando vía subcutánea
un ml. de bacterina a 10 pollos de mas de 7 semanas.
13.-Un número similar de pollos sirven como grupo control y
no se vacunan, ambos deben estar bien aislados y separados uno de otro.
14.- Se aplica una gota de un cultivo puro que contenga un
título de 10-8 a
todos los pollos de la prueba, vacunados y no vacunados.
15.- A las 48 horas se observan los senos nasales y se busca
si existe algún estertor traquobronquial tanto en pollos vacunados o no.
16.- El resultado será efectivo si todos los pollos
vacunados siguen normales y los no vacunados muestran inflamación en uno o
ambos senos nasales, estornudo, secreción mucosa y baja de consumo de alimento.
17.- Se hace una aislamiento de los pollos con inflamación
de senos nasales, debe ser positivo para Avibacterium paragallinarum
18.- La bacterina debe dar un 100% de protección, el periodo
de protección es proporcional al adyuvante empleado en el producto terminado
Bibliografia
1.- Isolation and Identification of Avian Pathogens por el
comité editorial de American Association of Avian Pathogens
2.-Clinical Diagnosis By Laboratory Metods. Todd, Sanford.
Wells
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